Western Blot Rapid Transfer Buffer

(20X)

Catalog Number：ED510

01/產(chǎn)品概述

立譜沃生物的Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)，即Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X)，是一種20倍濃縮的安全無(wú)毒害的用于Western Blot實(shí)驗(yàn)的快速濕轉(zhuǎn)緩沖液。本產(chǎn)品采用全新的快速轉(zhuǎn)印配方，15-30 min即可高效、快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。本產(chǎn)品為20倍濃縮(20X)溶液，使用前需要用適當(dāng)水和乙醇稀釋至1X。配制過(guò)程中，可用無(wú)水乙醇替代甲醇，無(wú)需使用劇毒的甲醇等試劑，安全無(wú)毒害。轉(zhuǎn)膜全程產(chǎn)熱小，無(wú)需外置冰浴。

02/產(chǎn)品組分

03/保存條件

常溫運(yùn)輸。室溫干燥處保存，有效期12個(gè)月。

04/產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 轉(zhuǎn)印快速、高效——500mA恒流轉(zhuǎn)膜15-20分鐘或400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-30分鐘，即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至印跡膜上，轉(zhuǎn)膜效果好。

2. 無(wú)需外置冰浴，僅使用內(nèi)置冰盒即可——轉(zhuǎn)膜過(guò)程產(chǎn)熱非常小，無(wú)需外置冰浴，減少蛋白損失。相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液更容易導(dǎo)致過(guò)度發(fā)熱，而在發(fā)熱程度相似的情況下傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長(zhǎng)時(shí)間。

3. 使用安全——可用無(wú)水乙醇替代甲醇，選擇靈活，可避免使用有毒的甲醇等試劑。

05/適用范圍

Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)適用于Western Blot濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜。兼容各種常見(jiàn)凝膠，例如Laemmli膠、預(yù)制膠、FastPAGE、Bis-Tris膠等。

06/使用說(shuō)明

一、Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(1X) 1000 mL的配制方法：

取Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) 50mL加入850 mL超純水中，加入100 mL 無(wú)水甲醇（或無(wú)水乙醇），混勻，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

二、參考轉(zhuǎn)膜條件：

根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件及儀器的不同，轉(zhuǎn)膜條件會(huì)有差別。通常條件下，轉(zhuǎn)膜電流可設(shè)置為電泳儀允許的最大電流。具體轉(zhuǎn)膜條件可根據(jù)電泳儀電流限定、凝膠厚度、分離膠濃度、目的蛋白分子量做出適當(dāng)調(diào)整。參考轉(zhuǎn)膜條件如下：

1. 梯度膠

濃度4%~15%，厚度0.75 mm，恒流400 mA，30 min以?xún)?nèi)所有條帶均可完成轉(zhuǎn)膜。

2. 普通PAGE膠

轉(zhuǎn)膜效率與分離膠濃度及厚度有關(guān)，對(duì)于各濃度1.0 mm 凝膠，采用恒流400 mA，按如下時(shí)長(zhǎng)即可將150 kDa 以下蛋白轉(zhuǎn)印*，若蛋白分子量大于150 kDa，需延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間5-10 min。

Ø PAGE膠厚度越厚，轉(zhuǎn)膜效率越低。對(duì)于厚度1.5 mm的凝膠，可將上表推薦的轉(zhuǎn)膜時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)5-10 min。

07/注意事項(xiàng)

1. PVDF膜使用前需用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒以上進(jìn)行活化。

2. 轉(zhuǎn)膜液稀釋為1x后請(qǐng)盡快使用，應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間存放于室溫，短期內(nèi)保存建議放置于4℃冰箱。

3. 轉(zhuǎn)膜時(shí)，如果出現(xiàn)報(bào)錯(cuò)而停止，需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過(guò)載、轉(zhuǎn)膜液過(guò)多或過(guò)少、轉(zhuǎn)膜槽短路或斷路等異常情況。

4. 回收的轉(zhuǎn)膜液可重復(fù)使用1-2次，但為取得更好的轉(zhuǎn)膜效果，不建議多次重復(fù)使用，以免影響轉(zhuǎn)膜效率。

5. 為了您的健康安全，請(qǐng)規(guī)范操作，穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。

6. 本產(chǎn)品僅供科研使用，請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療。

08/其他相關(guān)產(chǎn)品